用pet32a构建表达载体,目的片段是220bp左右,酶切是ecor1和hindlll,但酶切连接转菌提质粒后却只有2000bp做过pcr验证有目的条带,想不明白是为什么.2个月了,求救

用pet32a构建表达载体,目的片段是220bp左右,酶切是ecor1和hindlll,但酶切连接转菌提质粒后却只有2000bp做过pcr验证有目的条带,想不明白是为什么.2个月了,求救 表达载体的构建中目的片段与表达载体的连接最好是几个小时?时间长一点有什么影响么? 转化pET32a一个菌落也不长是什么原因啊我在做分子克隆,克隆了四个片段,要在pET32a载体上表达,可是酶切,连接,转化大肠杆菌BL21以后一个菌落也不长,我已经试过各种载体和目的片段的比例,而 什么是超表达载体?构建超表达载体的目的是什么?（详细一点）怎么用softberry预测基因？ 构建酵母表达载体,目的基因来自植物体,可以含有启动子,内含子,构建酵母表达载体,目的基因来自植物体.请问可以用直接提取DNA,设计引物pcr扩增得到的基因片段来连接转化吗?目的基因里可 您好,我看您在表达载体这一块懂的比较多,我想请教您我构建PET32a表达载体,但是没有办法表达,求原因您好,我看您在表达载体这一块懂的比较多,我想请教您我构建PET32a表达载体,但是没有办法 您好,我和你一样表达不出来,用的是pet32a,你用的说明载体表达出来的呢? 基因工程中,构建表达载体的目的是什么 目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒? 我有一段目的基因,需要构建表达载体,此时是扩增目的基因的全长还是?我用premier 5.0设计引物,然后扩增产物长度是200多,但我的目的基因是700多.需要构建表达载体,是扩增目的基因全长吗? 将目的基因导入大肠杆菌需要先在体外构建基因表达载体?用Ca２＋处理转化的方法和这个方法是并列关系? 基因工程题,求问什么是基因表达载体的构建是什么意思,谢谢2．在基因表达载体的构建中,下列说法不正确的是（ ） ①一个表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子 ②有了启动子才 载体PET32a+与PET30a有什么区别?我用的是PET32a+做载体,但之前他们克隆基因时设计的载体是PET30.现在想知道这两种载体的区别,看看是不是要重新做. 在构建基因表达载体时候,怎么利用选择培养基鉴别是质粒—质粒,目的基因—目的基因,还是质粒—目的基因 如何构建一个能高效表达目的基因的表达型载体 怎么样构建基因表达载体 基因表达载体构建步骤 基因表达载体的构建