目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/07 06:07:09

目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒?

有目的片段的引物就很简单,扩目的片段的PCR
如果没有,扩质粒PCR,然后电泳比较前后质粒的片段大小

目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒? 目的片段转入表达载体后,用什么方法检测?有没有除了测序,酶切,PCR,探针检测以外的方法?最好详细点. 目的基因连入表达载体后用不用先转入DH5a扩增、酶切鉴定然后再转入BL21? 能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增 TAKARA的PMD18-T载体可以用哪个通用引物验证?用了TAKARA的PMD18-T载体转入了目的片段,想用PCR验证下,该用什么引物验证 我在构建质粒:载体大小为9kb,目的片段为3.4kb,连接产物可以用普通的热击方法转化感受态Ecoli.DH5a吗? 我的片段转入ppicza载体后转化到DH5a里,菌落PCR验证成功,为何就是提不出质粒? 我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 我的目的片段连T载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR能P出目的片段,再提质粒用Ecor1做酶切,片段变小怎么回 表达载体的构建中目的片段与表达载体的连接最好是几个小时?时间长一点有什么影响么? DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别T载体是克隆载体,能把目的基因片段转染到大肠杆菌扩增,但不表达.我新手弱弱的问一句为什么不直接把目的片段拿去跑PCR就行了,干嘛要用克隆载体去获得大量 构建酵母表达载体,目的基因来自植物体,可以含有启动子,内含子,构建酵母表达载体,目的基因来自植物体.请问可以用直接提取DNA,设计引物pcr扩增得到的基因片段来连接转化吗?目的基因里可 如何将表达载体转入农杆菌 目的片段连接表达载体后酶切出非特异带为什么我的载体11KB,连接了目的片段.PCR能扩出目的带,双酶切出现了三条带,一条载体,一条目的条带,一条非特异带3KB左右.载体上这两个酶只有一个酶 酶切不出来,是怎么回事?转化涂板挑菌后,摇菌6-8h后,我用先前目的片段的引物,做了个菌液PCR,电泳后表明目的片段从菌液中扩出来了,这个应该说明目的片段连接到载体中了的,但我提出质粒后, 缺了起始密码子“ATG”的一段基因在转入表达载体之后表达出的产物在功能上有没有影响?由于种种原因,PCR后缺失了“ATG”,请问如果转入表达载体表达之后,产物与正常的表达有没有什么区别 关于 克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCRPCR 用T载体PRIMER,然后测序,然后酶切出片段---------》从而达到得到很多此片段的目的.这个做法行么?或者别 关于双元载体我还想再问一些,Ti载体和双元载体什么区别,若要做农杆菌转化的话,用哪个比较好啊,还是都可以用?前提是我有的是做基因枪转化的表达载体质粒.