色谱法中保留时间越长越好吗
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 10:49:37
色谱法中保留时间越长越好吗
不是的.这要具体情况具体分析.
分析要考虑多方面因素:1,快速分析,就是时间问题.你如果一个样品运行两三个小时,那太影响效率了.2,准确度.样品保保留时间越短越不利于分离,但时间越长,样品在柱子里扩散越严重,越容易影响分析结果.3,成本.不只是上面说的时间成本,还要考虑人力成本,还有试剂,用电,仪器损耗等成本.尤其试剂,用乙腈做流动相,时间过长消耗肯定是非常大的.
所以说,做什么都有个度.那对于分离来说,什么是最优化呢?我个人觉得,如果说是理想的分离,那在所有的峰都分离的情况下,前后两个峰分离度都是2左右就是最好的了(药典要求是1.5),因为1.5的分离度刚好是基线分离,如果再大一点,对于分离还可以有个缓冲,所以选择了2.这样,也会使样品的扩散也最小,时间最快,成本也最低.当然这要求开发分析方法的时候,要用合适的条件,可能要通过实验选择好流动相和柱子,同时还可能要用梯度才能达到这样的效果.
在方法开发的时候就要考虑一些特殊的物质了.比如反相色谱时,如果检测的是胺基的盐酸盐,因为这类物质基本没太多的保留,色谱柱要选择尽大保留的C18,而不能用C8柱,流动相就可能要选择甲醇水系统,必要时可能要用离子对流动相.而另一些保留太大的物质,比如极性非常弱的苯或蒽,这类物质保留如果太大,可能通过用C8柱,洗脱能力强的流动相来把保留时间提前.
一般来说,在达到合适的分离的情况下,反相色谱主峰保持在3-20分钟内比较合适,最好是5-10分钟出峰.这也同相适合气相色谱.
但是要考虑到时间啊,保留时间过长做实验的时间也要相应延长,如果结果差不多就好了,没有必要做太久。
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