实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么?结果有何异同?能说明的问题是什么?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/16 08:06:44
实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么?结果有何异同?能说明的问题是什么?
原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光.
反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段.如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳.
结果:荧光定量可以实现精确定量,普通pcr则不行.荧光定量体现可以看到整个扩增过程,可以看到扩增效率,溶解温度,直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的.
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荧光PCR是为了测量mRNA表达量的 普通PCR是为了扩增目的片段的
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行“定量分析”的方法。
记住,实时荧光定量是定量分析
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荧光定量是定量的,普通PCR是定性的,结果一个是说明含有多少,另一个说明有还是没有,前者更精确一点
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