谁能给我讲解一下western blotting的主要用途啊?fumei_yi!您给我这么多信息.我现在最主要的是这样的一个问题,就是如果您现在从一个生物体内发现了一个特异蛋白,比如通过双向电泳比较对照和
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/28 08:25:05
谁能给我讲解一下western blotting的主要用途啊?
fumei_yi!您给我这么多信息.我现在最主要的是这样的一个问题,就是如果您现在从一个生物体内发现了一个特异蛋白,比如通过双向电泳比较对照和某种处理,在处理样品中发现一个或一些特异点,当然是在该处理中出现了新的蛋白质了.为了鉴定该蛋白质,我们可以采取一些方法,比如测序列用序列比较法检索与之相类似的蛋白质等.但由于双向电泳操作烦琐,重复性不好,我们可以采用抗原-抗体特异性结合的方法来检测该蛋白质,就不必要用双向电泳了,可是在这之前必须有该抗原的抗体.我想知道的是该抗体是怎么得到的呢?如果已经得到该纯化的免疫球蛋白了还反过来去检测其抗原干什么啊?也就是以前已经提纯出该抗原了吧?
用于检测混合样品中的一种或多种抗原.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据分子大小分离样品蛋白,沿着电泳方向产生一系列的蛋白条带.因为凝胶基质使得大分子蛋白难于进入,所以要进行抗原抗体反应首先需将凝胶中的蛋白转移到较易于进入的介质,该过程称为印迹.将凝胶与硝酸纤维膜或尼龙膜紧挨,加场以使蛋白转移到膜上,并使两者相结全,这种特殊形式的印迹即为:western blotting
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