PCR跑出非特异条带?怎么办?1楼做PCR的时候加了水为模板,做为阴性对照.可是居然跑出了跟目的条带大小一样的条带,只是淡了一些.目的片段大小就100bp左右.可能是什么原因呢?做PCR的水要求高

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/17 11:28:47

PCR跑出非特异条带?怎么办?
1楼
做PCR的时候加了水为模板,做为阴性对照.可是居然跑出了跟目的条带大小一样的条带,只是淡了一些.目的片段大小就100bp左右.
可能是什么原因呢?
做PCR的水要求高吗?需要每次重灭吗?

可能是水污染了,另外还有你操作及操作环境的原因.
建议ddH2O灭菌后分装到2ml离心管放入-20°备用,每次用一管
如果容易污染的话,建议你到超净台中操作PCR过程

其实很简单,把你一切怀疑的因素再做一对照就行了,比如把你怀疑污染的水和你认为绝对干净的水做两个对照管,在下次pcr时放进去,结论就有了
还有,低浓度的胶很难区分100bp以下的条带,那带也有可能是因物二聚体。
反正多做几次对照就什么都知道了...

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其实很简单,把你一切怀疑的因素再做一对照就行了,比如把你怀疑污染的水和你认为绝对干净的水做两个对照管,在下次pcr时放进去,结论就有了
还有,低浓度的胶很难区分100bp以下的条带,那带也有可能是因物二聚体。
反正多做几次对照就什么都知道了

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PCR跑出非特异条带?怎么办?1楼做PCR的时候加了水为模板,做为阴性对照.可是居然跑出了跟目的条带大小一样的条带,只是淡了一些.目的片段大小就100bp左右.可能是什么原因呢?做PCR的水要求高 PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办 PCR电泳出现非特异条带原因概括地讲…… PCR产物条带浅怎么办 做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不 PCR引物blast结果,如图 12处是我的目的基因 可是还出来结果三,是不是PCR的结果就会出现非特异条带?我是不是应该考虑换引物啊? 基因的PCR扩增出现非特异扩增产物,何故? PCR反应有非特异性扩增怎么办PCR后跑胶,发现有非特异扩增,亮度比目的片段小,该怎么办呢?接下来要做酶切…谢谢!除了切胶纯化外,还有没有别的方法,比如通过调节PCR反应的条件( 目的片段连接表达载体后酶切出非特异带为什么我的载体11KB,连接了目的片段.PCR能扩出目的带,双酶切出现了三条带,一条载体,一条目的条带,一条非特异带3KB左右.载体上这两个酶只有一个酶 请问若因为非特异扩增导致PCR产物弥散,理论上弥散带里是否应该包含目的条带?谢谢TT-TTPCR产物电泳弥散,因为退火温度为55,所以初步考虑是退火过低导致的非特异扩增.但小女子有一疑问,我的 RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些? PCR过后用3%的琼脂糖 140V的电压跑出来为什么条带不清楚 PCR跑出来的条带比较弥散,主要有哪些原因啊? ISSR标记,PCR产物电泳条带不清晰,怎么办 pcr退火温度高特异性强,为什么?..低 非特异多 为什么?RT 关于T-A克隆的一些问题我做完了T-A克隆,提取质粒以后,用我的目的基因引物做PCR,跑电泳跑出来了目的条带,但是有一些杂带,是怎么回事呢. 做PCR时引物过量会产生什么样的条带 ,第一次做荧光定量PCR,内参基因可以跑出来,但是荧光峰度比较低,溶解曲线也不错,但目的基因完全跑不出目的基因在普通PCR仪上,可以跑出来,跑电泳条带清晰,引物二聚体不明显.但是在realtime-p