DNA提取缓冲液如何配?0.1mol/L Tris-Hcl (pH=8.0) 0.1mol/L sodium EDTA (pH=8.0) 1.5 mol/L NaCl
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/30 04:01:45
DNA提取缓冲液如何配?
0.1mol/L Tris-Hcl (pH=8.0) 0.1mol/L sodium EDTA (pH=8.0) 1.5 mol/L NaCl
根据Tris 和Hcl的相对原子质量,n=m/M=0.1mol 称出所需要的Tris 和Hcl的量(所需缓冲液不是很多的话,可以配100ml的溶液,药品质量相对减少),同理配EDTA和Nacl,溶解,调节pH.
还可以加入10%的CTAB
CTAB(十六烷基三乙基溴化铵)是一种去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,当降低溶液盐浓度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)时,从溶液中沉淀,通过离心就可将CTAB-核酸的复合物与蛋白,多糖类物质分开。
最后通过乙醇或异丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或异丙醇而除去。...
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还可以加入10%的CTAB
CTAB(十六烷基三乙基溴化铵)是一种去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,当降低溶液盐浓度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)时,从溶液中沉淀,通过离心就可将CTAB-核酸的复合物与蛋白,多糖类物质分开。
最后通过乙醇或异丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或异丙醇而除去。
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