质粒转染细胞不表达的问题~想研究某跨膜蛋白,构建真核表达质粒（构建了多种,载体有PCDNA3.1-FLAG,PCDNA3,1-V5,PCMV-5'端MYC,PCDNA3-5'FLAG,PCDNA3-5'HA）,转染始终不表达,细胞换过293T,AD293,COS1,COS7等,转染操

质粒转染细胞不表达的问题~想研究某跨膜蛋白,构建真核表达质粒（构建了多种,载体有PCDNA3.1-FLAG,PCDNA3,1-V5,PCMV-5'端MYC,PCDNA3-5'FLAG,PCDNA3-5'HA）,转染始终不表达,细胞换过293T,AD293,COS1,COS7等,转染操 质粒转染细胞第一次预实验转染效率较好,再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗? 哪里细胞的质粒转染做得好? 如何让一个细胞过度表达某种基因,来观察此基因的作用,瞬时转染和稳定转染都用什么方法转染时每个细胞只近入一个质粒还是很多质粒,过度表达的标准是什么呢 哪一家公司细胞的质粒转染做得好? 转染的cas9质粒在细胞中能复制吗 您好,瞬时转染所用的质粒是病毒载体质粒还是真核表达载体质粒? colo205的转染问题有人养过colo205吗?我要做shRNA方面的研究,想通过脂质体把shRNA转到colo205中,但是由于它是半悬浮细胞,我对转染效率以及转染后的筛选不知道怎么弄有人做过这方面的实验吗?一 不知哪家公司可以做质粒转染细胞?我最近构建完质粒,正在做质粒转染细胞,可是发现转染后细胞死亡率高,转染效果不理想,考虑要不要改做慢病毒感染,不知哪家公司可以做? 真核表达分泌型蛋白,有信号肽序列的质粒转染293T细胞,western鉴定,那么转染之后上清和细胞怎样收样?主要是样品的收集问题,我做western阳性对照都出来了,但是待检样做不出来,细胞核上清要分 质粒转染肺癌细胞,转染效率一般能有多少?我用FUGW质粒直接转染肺癌株DH3,荧光显微镜下观察,转染效率大约30%左右,有进一步提高的潜力吗?如果我的目的是下调某个miRNA的表达量,能否用qRT-PCR 我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色 做质粒转染293T细胞,提取质粒后用单酶切嘛?为啥是稳定转染，构建一个细胞系 请问HEK293细胞如何将质粒转染进去,有没有具体的步骤?我有lipo2000 进行质粒的细胞转染实验,摸索条件包括哪些呢?比如 温度. 细胞过表达中质粒如何构建及转染?本人才开始接触,期待基础知识、注意事项及技能. 真核过表达质粒,原核过表达质粒的区别~比如我需要过表达人恶性黑色素瘤细胞中的某蛋白,能在大肠杆菌中扩增后,转染到人恶性黑色素瘤细胞中,那么我需要的质粒是真核还是原核? 用于转染的质粒 怎么保存