急求《医用同位素示踪学》问答题答案,11道,第一组,1． 放射性同位素示踪技术的基本原理、主要特点和类型?2． 放射自显影术的基本原理、主要特点和类型?3． 液体闪烁示踪术的基本原理和

急求《医用同位素示踪学》问答题答案,11道,第一组,
1． 放射性同位素示踪技术的基本原理、主要特点和类型?
2． 放射自显影术的基本原理、主要特点和类型?
3． 液体闪烁示踪术的基本原理和特点?
4． 淋巴细胞转化示踪的原理、刺激因子、核素开始标记时间和最佳标记时间?
5． 放射性核素示踪设计应考虑那些方面?
6． 核酸探针的分类及各个探针的特点?
7． 载体共性?
8． 碱裂解法提取质粒的原理?
9． 应用酚提取法进行核酸提纯的原理?
10． 试述三种检测核酸的手段及其灵敏度?
11． 核酸标记检测的参数及其定义?

1． 放射性同位素示踪技术的基本原理、主要特点和类型?
（1）原理：利用放射性核素或其标记物作为示踪剂在生物体内外研究各种物质或现象的运动规律.应用辐射检测仪器进行物质动态变化规律的追踪、定位或定量分析.
（2）特点：灵敏度高；可在生理状态下试验；测量方法简便多样,既能定位又能定量；放射性生物效应及放射卫生防护
(3) 类型：离体示踪实验；整体示踪实验；
2． 放射自显影术的基本原理、主要特点和类型?P61—P68
特点：高灵敏度、高分辨率、影像逼真且确切、机能和形态学方法的结合、整体水平上各脏器代谢功能的比较很客观、细胞内物质代谢研究的唯一方法
类型：①宏观放射自显影
光学显微镜自显影
②微观放射自显影
电子显微镜自显影
3． 液体闪烁示踪术的基本原理和特点?
P23--P26
4． 淋巴细胞转化示踪的原理、刺激因子、核素开始标记时间和最佳标记时间?
P166--P167
5． 放射性核素示踪设计应考虑那些方面?
6． 核酸探针的分类及各个探针的特点?
DNA探针: DNA探针无性无限繁殖,方法简便,不易降解,标记方法成熟.
cDNA探针:互补于mRNA的DNA分子,故不含内含子和高度重复序列,是一种较理想的核酸探针,但cDNA不易获得,限制了其应用.
RNA探针:杂交效率较高;假阳性减少;减少了本底的干扰;有时影响杂交的特异性
寡核苷酸探针1. 人工合成,无重复序列; 2.探针链短,杂交时间比克隆探针短; 3.长度10-50bp(15-20bp),能明显降低杂交Tm值; 4. 可大量合成并进行非放射性标记
7． 载体共性?
可以复制；易于分离提纯；具有认别和筛选系统,有适合装载外源DNA的限制性内切酶
8.碱裂解法提取质粒的原理?
在溶菌酶的作用下,裂解细菌,加入适当浓度的NaOH,使细菌基因组和质粒DNA均处于变性状态,当加入酸性醋酸钠后,小分子质粒很快复性为可溶状态,而变性的蛋白质、细菌胞壁和大分子难以复性的基因组DNA形成沉淀,通过离心将质粒分离.
9． 应用酚提取法进行核酸提纯的原理?
它能促使蛋白质变性、脂类溶于酚相,而未变性的核酸仍溶解在水相中,然后通过水与酚的分离将核酸分离出来
10． 试述三种检测核酸的手段及其灵敏度
1.用紫外分光光度仪, 可定量检出ug水平 (ug/ml) DNA；
2. 溴化乙锭(E.B)染核酸用荧光紫外分析可定量10ng DNA;
3. 用放射性核素标记核酸, 可定量检测pg DNA.
11． 核酸标记检测的参数及其定义?
常用β线核素特性: Tp 射程 应用
3H：0.0186MeV, 12.33a, 0.01mm 合成修复定位
32P：1.71MeV, 14.3d, 1-8mm 杂交
35S：0.167MeV, 86.7d, 0.25mm 序列分析
131I： 0.81MeV, 8.04d, 2.46mm 蛋白表达

最同位素示踪法（isotopic tracer method）是利用放射性核素作为示踪剂对研究对象进行标记的微量分析方法，同位素示踪法基本原理和特点 同位素示踪所利用的放射性核素（或稳定性核素）及它们的化合物，与自然界存在的相应普通元素及其化合物之间的化学性质和生物学性质是相同的，只是具有不同的核物理性质。因此，就可以用同位素作为一种标记，制成含有同位素的标记化合物（如标记食物，药物和代谢物质等...

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最同位素示踪法（isotopic tracer method）是利用放射性核素作为示踪剂对研究对象进行标记的微量分析方法，同位素示踪法基本原理和特点 同位素示踪所利用的放射性核素（或稳定性核素）及它们的化合物，与自然界存在的相应普通元素及其化合物之间的化学性质和生物学性质是相同的，只是具有不同的核物理性质。因此，就可以用同位素作为一种标记，制成含有同位素的标记化合物（如标记食物，药物和代谢物质等）代替相应的非标记化合物。利用放射性同位素不断地放出特征射线的核物理性质，就可以用核探测器随时追踪它在体内或体外的位置、数量及其转变等，稳定性同位素虽然不释放射线，但可以利用它与普通相应同位素的质量之差，通过质谱仪，气相层析仪，核磁共振等质量分析仪器来测定。
2放射自显影术用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。然后经过显影、定影处理显示还原的黑色银颗粒，即可得知标本中标记物的准确位置和数量，放射自显影的切片还可再用染料染色，这样便可在显微镜下对标记上放射性的化合物进行定位或相对定量测定。
3液体闪烁计数器主要测定发生β核衰变的放射性核素，尤其对低能β更为有效。其基本原理是依据射线与物质相互作用产生荧光效应。首先是闪烁溶剂分子吸收射线能量成为激发态，再回到基态时将能量传递给闪烁体分子，闪烁体分子由激发态回到基态时，发出荧光光子。荧光光子被光电倍增管（PM）接收转换为光电子，再经倍增，在PM阳极上收集到好多光电子，以脉冲信号形式输送出去。将信号符合、放大、分析、显示，表示出样品液中放射性强弱与大小。
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