提取甘薯RNA真的好难啊 最好告诉我用的什么试剂盒,最要注意什么!我提的一直不好,急

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/14 18:11:28

提取甘薯RNA真的好难啊 最好告诉我用的什么试剂盒,最要注意什么!
我提的一直不好,急

甘薯的没提过,最要注意的是除RNase,因为它无处不在,RNA又非常容易降解.
所有用具最好用RNase inhibitor清洗一下,再提.

有试剂盒吗?我不知道在哪看过高淀粉样品RNA提取的资料,一时忘了在哪了

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
R0011 Beyozol(总RNA抽提试剂)
100ml 398.00元
1. 细胞裂解或组织匀浆。
a. 贴壁细胞
吸尽培养液,每10平方厘米细胞加入1ml Beyozol。一般六孔板每孔加
1ml Beyozol,12孔板每孔加0.5ml Beyozol。晃动3-5下,...

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
R0011 Beyozol(总RNA抽提试剂)
100ml 398.00元
1. 细胞裂解或组织匀浆。
a. 贴壁细胞
吸尽培养液,每10平方厘米细胞加入1ml Beyozol。一般六孔板每孔加
1ml Beyozol,12孔板每孔加0.5ml Beyozol。晃动3-5下,再用枪吹打2-3下,确保全部裂解,然后吸
至离心管中。
b. 悬浮细胞
离心收集细胞,吸尽液体,每五百万至一千万动植物或酵母细胞,或一千万细菌,加入1ml
Beyozol。用枪吹打或适当vortex,确保全部裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分,可用匀浆器匀
浆,确保全部裂解。
c. 组织
先将组织剪切成小块,放入普通玻璃匀浆器内。每50mg-80mg组织加入1ml Beyozol,匀浆。对于RNA
完整性要求比较高的情况,推荐先液氮冷冻组织块,然后在低温下用研钵研碎组织,随后再加入
Beyozol进行总RNA抽提。
2. 对于某些蛋白,多糖或脂含量很高的细胞或组织,Beyozol裂解后可能会有不溶物或油脂状漂浮物。需
12,000g 4℃离心10分钟,然后吸取澄清的Beyozol裂解产物至一新的离心管中。
3. 室温放置5分钟,使样品充分裂解。
4. 每毫升 Beyozol加入0.2ml氯仿,vortex混匀或猛烈晃动15秒,室温放置2-3分钟。
5. 12,000g 4℃离心15分钟,然后吸取含总RNA的上层无色水相至一新的离心管中,每毫升Beyozol约可吸取
0.5-0.55ml。
6. 按每毫升最初的Beyozol加入0.5ml异丙醇,颠倒数次混匀,室温沉淀10分钟。如果希望提取microRNA等
小RNA,推荐-70℃沉淀过夜。
7. 12,000g 4℃离心10分钟,在管底可见RNA沉淀,弃上清。
8. 每毫升最初的Beyozol加入1ml 75%乙醇(DEPC水配制),vortex或颠倒混匀,
9. 7,500g 4℃离心5分钟,弃上清。再用离心机甩一下(>5,000rpm, 离心1秒),小心吸尽液体。
10. 待RNA略干后,加入20ml DEPC水溶解,-70℃冻存。注意,切勿让RNA过分干燥,否则将极难溶解,且测
出的A260/280值会低于1.6。
产品简介产品简介:
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
R0016 Trizol(总RNA抽提试剂) 100ml 478.00元
使用说明:
1. 细胞裂解或组织匀浆。
a. 贴壁细胞
吸尽培养液,每10平方厘米细胞加入1ml Trizol。一般六孔板每孔加
1ml Trizol,12孔板每孔加0.5ml Trizol。晃动3-5下,再用枪吹打2-3下,确保全部裂解,然后吸至
离心管中。
b. 悬浮细胞
离心收集细胞,吸尽液体,每五百万至一千万动植物或酵母细胞,或一千万细菌,加入1ml Trizol。
用枪吹打或适当vortex,确保全部裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分,可用匀浆器匀浆,确保全部
裂解。
c. 组织
先将组织剪切成小块,放入普通玻璃匀浆器内。每50mg-80mg组织加入1ml Trizol,匀浆。对于RNA完
整性要求比较高的情况,推荐先液氮冷冻组织块,然后在低温下用研钵研碎组织,随后再加入Trizol
进行总RNA抽提。
2. 对于某些蛋白,多糖或脂含量很高的细胞或组织,Trizol裂解后可能会有不溶物或油脂状漂浮物。需
12,000g 4℃离心10分钟,然后吸取澄清的Trizol裂解产物至一新的离心管中。
3. 室温放置5分钟,使样品充分裂解。
4. 每毫升 Trizol加入0.2ml氯仿,vortex混匀或猛烈晃动15秒,室温放置2-3分钟。
5. 12,000g 4℃离心15分钟,然后吸取含总RNA的上层无色水相至一新的离心管中,每毫升Trizol约可吸取
0.5-0.55ml。
6. 按每毫升最初的Trizol加入0.5ml异丙醇,颠倒数次混匀,室温沉淀10分钟。如果希望提取microRNA等小
RNA,推荐-70℃沉淀过夜。
7. 12,000g 4℃离心10分钟,在管底可见RNA沉淀,弃上清。
8. 每毫升最初的Trizol加入1ml 75%乙醇(DEPC水配制),vortex或颠倒混匀,
9. 7,500g 4℃离心5分钟,弃上清。再用离心机甩一下(>5,000rpm, 离心1秒),小心吸尽液体。
10. 待RNA略干后,加入20ml DEPC水溶解,-70℃冻存。注意:切勿让RNA过分干燥,否则将极难溶解,且测
出的A260/280值会低于1.6。

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你材料难提是因为淀粉(多糖类物质对提取的干扰),华越洋核酸提取试剂领导者!我是华越洋生物的,我们有专门针对提取多糖类样品的RNA提取试剂盒系列产品。已有成功提取多糖类样品,葡萄,番茄,小麦,水稻种子这种淀粉(多糖含量高)的样品。需要请来电。...

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你材料难提是因为淀粉(多糖类物质对提取的干扰),华越洋核酸提取试剂领导者!我是华越洋生物的,我们有专门针对提取多糖类样品的RNA提取试剂盒系列产品。已有成功提取多糖类样品,葡萄,番茄,小麦,水稻种子这种淀粉(多糖含量高)的样品。需要请来电。

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