32a质粒转化BL21,涂氨苄抗性板有菌落,检测不出目的条带,请问如何解决这个问题?

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/15 01:22:48

应该从以下几个方面考虑：
可能是目的基因没有整合到32a中；
可能是PCR模板量不足；
可能是挑取的菌落为假阳性；
可能是PCR反应条件不合适.
还有的时候出现的极端的原因,是细菌就是无法整合这个基因,所以无论如何都无法得到阳性结果,我就遇到过这种情况.
这类实验经常有这种问题,最有效的方法就是从头开始重新做,因为可能出问题的地方比较多,而我们又没有时间逐个去分析.

质粒里连东西了么？可能没连进去质粒自连了呗或者质粒酶切的时候没有切开

质粒有没有做酶切验证？

32a质粒转化BL21,涂氨苄抗性板有菌落,检测不出目的条带,请问如何解决这个问题? 转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒? 为什么我直接将抗氨苄的质粒转化到感受态BL21中竟然不长菌为什么我直接将抗氨苄的质粒转化到感受态BL21中竟然不长菌利用Ti质粒把卡那霉素抗性基因转化如烟草细胞并获得两株具有抗性的植株.利用Ti质粒把卡那霉素抗性基因（kanamycin resistance gene）转化如烟草细胞并获得两株具有抗性的植株.植株1与野生型关于表达质粒转化BL21(DE3)的问题用表达空载体pET28a和重组表达质粒pET4c9转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,在含有卡那霉素的琼脂平板上选择培养,挑取pET28a和pET4c9转化菌落,请教各位大侠,如果挑取? 一个质粒携带有氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因.利用卡那霉素抗性基因内部的EcoRI酶切位点进行人类生长激素基因的克隆.二者连接后转化对两种抗生素都敏感的大肠杆菌菌株.如何大肠杆菌里面有质粒吗?如果大肠杆菌有质粒的话,那做转化的感受态细胞里有没有质粒啊?如果有质粒是不是也有抗性基因?那蓝白筛选还有意义吗? SV40质粒是否含有AMP抗性基因? 转化植物的农杆菌质粒能转化吗?农杆菌质粒PBI121,含卡那霉素抗性基因、CaMV35S启动子,GUS报告基因和、NOS终止子,这个质粒主要用于植物的转化如果我把这个质粒用来转化某种曲霉,CaMV35S启动子人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是 A.提高受体细胞在人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是A.提高 13．科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是 A．提高受体细胞在自然环13．科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是（）如题谢谢了人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是（） A 感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)这两种沉淀正常么?是什么原因造为什么用IPTG诱导蛋白没表达?双酶切及PCR验证目的片段连到表达载体pET28a上了(所用的内切酶是BamH1,Hind111).重组质粒转化BL21,试了不同的IPTG浓度,诱导温度,就是没蛋白表达.后来重组质粒转化JM10 氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上叫什么抗性基因在质粒上,怎样起筛选作用? BL21的转化方法和DH5一样吗?