如何做洋葱根尖实验?

如何做洋葱根尖实验?

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1．观察部位：植物体的根尖、茎尖等分生区的细胞.
2．分裂过程：高等植物细胞有丝分裂的一个细胞周期依次分为间期和分裂期的前期、中期、后期和末期.
3．处理和观察过程：各个细胞的分裂是独立进行的,同一时刻各个细胞所处的分裂时期也是不同的,用药物杀死和固定正在分裂的分生组织细胞,对染色体进行染色,压片制成临时装片,用高倍显微镜观察,就可观察到某一时刻被杀死后的细胞“众生相”,根据细胞中的染色体的存在状态,判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂过程.
4．染色原理：细胞核内的染色体（质）容易被碱性染料（龙胆紫或醋酸洋红等）着色.
实验材料用具
1．生物材料：洋葱（或蒜、葱等）.
质量分数为15%的盐酸溶液；
体积分数为95%的酒精溶液；
质量浓度为0.01 g/mL或0.02 g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）.
3．实验用具：显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,剪刀,镊子,滴管,解剖针,洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片等.
你知道吗?请你参与讨论以下问题!
（1）培养过程中为什么要换水?
（保证根生长过程中进行有氧呼吸所需要的氧气.）
（2）为什么要待根长至1～5cm?
（此时的根分裂最旺盛,最有利于实验的进行.）
你知道吗?请你参与讨论以下问题!
（1）上述操作中有哪些措施和方法保证了根组织细胞能够相互分散开来?
（药液解离、镊子弄碎、拇指压片）
（2）有些因素会影响细胞周期各时期的长短,实验过程中会产生一些误差.你认为上述整个操作中有哪些因素可能会影响到实验结果?
（a．取材时间 b．洋葱品种c．室内温度d．解离液、染色液的浓度e．解离和染色时间 f.镊子弄碎、拇指压片程度 g.计数的细胞是否属于分生区的细胞 h.细胞周期各时期的区分是否准确）
（3）你认为装片制作成功的关键步骤是什么?
（装片制作是否成功,关键的步骤是解离,用药液使组织中的细胞相互分离开来,便于最后制片时能被压成一薄层进行显微观察.解离液中酒精的作用是迅速杀死细胞,固定细胞的分裂相；而盐酸的作用是使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的.）
3． 洋葱根尖细胞有丝分裂的观察
你知道吗?请你参与讨论以下问题!
（1）上述表中,每一时期的细胞数/计数细胞的总数的比值大小能够反应什么问题?（该比值的大小近似地反应了各个时期的相对时长,比值越大,该期越长,反之越短）
（2）如果以不同植物材料的间期细胞数/分裂期的细胞数这一比值作为衡量指标,请问你是选择这一比值大的植物材料还是选择比值小的植物材料做实验比较好?
（选择比值小的植物材料做实验好.因为这一比值越小,说明分裂期占细胞周期的时长比例越大,越有利于观察分裂期的变化）
（3）为什么表格中要选择2个样本?
（为了减小实验统计的误差,理论上样本数越多越好,但实际操作起来比较麻烦,本实验只是为了定性说明问题,所以只选择了2个样本）
4．绘图
你知道绘制生物图的一些基本要领吗?
（1）用铅笔绘图；
（2）注意图的大小比例适中,绘制时先勾画出大致轮廓,再细致精准各个部分；
（3）图中只能有线和点,不能用填涂和阴影等表示；
（4）图绘制好后,要注明图的名称,还要用线段标注出各主要结构的名称.
（5）绘图要依据观察的镜像,做到客观真实,必要时刻参考教材和资料.
一、洋葱根尖的培养
师：怎样培养洋葱根尖?在培养过程中,应注意哪些问题?
生：在实验课前3～4天,取洋葱一个,放在广口瓶上,装满清水,让洋葱的底部接触瓶内的水面.把广口瓶放在温暖的地方培养.待根长约5 cm时,取健壮的根尖制成临时装片.注意的问题：应选择底盘大的洋葱做生根材料；剥去外层老皮,用刀削去老根,注意不要削掉四周的根芽；培养时注意每天换水1～2次,防止烂根.
二、装片的制作
在制作过程中,学生结合着教师的提问,边回答边操作,从而知道在进行该操作中应注意的事项,以及如何进行该操作.由于解离、漂洗、染色三个步骤中,都有一段等待时间,教师应利用这些空隙,要求学生讨论在进行该操作时的注意事项,以保证该操作的顺利进行,也可做一些相关的题目,来巩固该部分的内容.
1.取材与解离
师：取材的时间最好在什么时候进行?解离过程中,应注意哪些问题?生：在上午10时至下午2时,剪取洋葱根尖2～3 mm,立即放入盛有盐酸和酒精混合液（1:1）的玻璃皿中,在室温下解离
3～5 min,至根酥软为止.解离中,应注意时间的把握,不能太长也不能太短.解离太长使细胞的结构破坏,影响制片的效果,太短则不易使细胞分离,观察时细胞容易重叠.解离后细胞已被盐酸杀死,不具备活性.
2.漂洗
师：为什么要进行漂洗?怎样进行漂洗?
生：由于染色剂是碱性染液,如不漂洗,酸碱发生反应,不利于着色；同时也是为了洗去药液,防止解离过度.用镊子把酥软的根取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min.
3.染色
师：在细胞中,能被碱性染液染成深色的物质是什么?染色中,为什么要把握好染色的浓度和时间?
生：能被碱性染液染成深色的物质是染色体.染色时,染液的浓度和时间的把握要好,否则染色过深,不易观察细胞中的染色体.
4.制片
师：实验中,要使细胞分离和分散开,需采取哪些措施?
生：先用镊子将根尖弄碎,盖上盖玻片；在盖玻片上加一片载玻片,用拇指轻压载玻片.压片时用力要适当,过重会将组织压烂,过轻则细胞不易分散.
三、洋葱根尖细胞有丝分裂的观察
1.低倍镜观察
在低倍镜下,先找到分生区细胞,观察细胞的形态特点.
2.高倍镜观察
师：在一个视野中能不能观察到一个细胞有丝分裂的连续过程?能不能找全有丝分裂各时期的细胞?如何操作才能找全各个时期的细胞?
生：在一个视野中不能观察到一个细胞有丝分裂的连续过程,因细胞在解离时已经被杀死,不再进行细胞分裂了.不能,因在一个视野中,我们只能找到某一时期的细胞图像,要想看全各时期的细胞,应移动装片,在不同的视野中寻找.
师：在你的观察结果中,处于哪一时期的细胞最多?怎样确认一个细胞周期中各个时期的长短?
生：处于间期的细胞最多,因间期持续的时间最长.确认细胞周期中各时期的长短,就看在这一时期中观察到的细胞的多少.
四、绘图
教师要求学生根据自己在实验中观察到的各时期的细胞特点,绘制有丝分裂前期、中期、后期的简图,并能区分各时期细胞的特点.
摘自百度文库