单酶切和双酶切的定义分别是什么?它们有什么不同?做实验的时候要把400bp目的片断连到pcDNA3.1(+)质粒中去：单酶切质粒后用T4 DNA连接酶连接,转化到感受态细菌去,涂板有细菌生长,用目的基因

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/03 12:29:12

单酶切和双酶切的定义分别是什么?它们有什么不同?
做实验的时候要把400bp目的片断连到pcDNA3.1(+)质粒中去：单酶切质粒后用T4 DNA连接酶连接,转化到感受态细菌去,涂板有细菌生长,用目的基因的引物做PCR,产物电泳获得目的条带.听说要用双酶切.两者有什么区别?

单酶切就是只用一个限制性内切酶去切你的质粒,环状的质粒就成为线状的了,但质粒的大小不变
双酶切用两个限制性内切酶,质粒上就产生了两个缺口,环状质粒就变成两段线状DNA了.回收你需要的那一段,因为它的两端和你的目的基因带有互补的黏性末端（当然目的基因也要用这两种酶切才行）,在T4DNA连接酶在作用下,它们就连到一起了.
你该看看《生物化学》或基因工程方面的书.这都是基本的知识啊.

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