免疫组化为什么要用一抗又要用二抗啊虽然是个很简单的很白痴的问题.但是我一直不理解………………速答,
免疫组化为什么要用一抗又要用二抗啊
虽然是个很简单的很白痴的问题.但是我一直不理解………………速答,
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西.一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的.
二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗.
如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗.但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物.所以现在的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗.而一抗识别底物.
这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来.
底物——就是你要检测的东西
一抗——可以特异的结合到底物上的抗体,作用是中介,抓住底物,再招呼二抗过来
二抗——可以结合到一抗上,并带有可以被检测出的标记的抗体,作用是被检测出来,自己不能结合底物,却可以结合一抗,等一抗抓住底物了再上去结合一抗,通过检测二抗,就能找到底物了。
举例:你要检测A蛋白是否存在,先把一抗加上去,让一抗充分结合底物A蛋白后,洗掉没结合上的一抗,然后...
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底物——就是你要检测的东西
一抗——可以特异的结合到底物上的抗体,作用是中介,抓住底物,再招呼二抗过来
二抗——可以结合到一抗上,并带有可以被检测出的标记的抗体,作用是被检测出来,自己不能结合底物,却可以结合一抗,等一抗抓住底物了再上去结合一抗,通过检测二抗,就能找到底物了。
举例:你要检测A蛋白是否存在,先把一抗加上去,让一抗充分结合底物A蛋白后,洗掉没结合上的一抗,然后加上有荧光的二抗,二抗和已经结合了A蛋白的一抗再结合,洗掉没结合上的二抗,然后观察荧光显色,就知道A蛋白存在于什么部位了。
要点:一抗二抗都是一种可以特异结合别的东西的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)
收起
一抗特异性结合组织中你要检测的物质,而二抗则能和一抗结合,并带有放射性、生物素或者地高辛标记,使得你可以观察到。